BasoStep:

Detección de la activación tras la estimulación con alérgenos mediante citometría de flujo.

Este kit permite la determinación de las reacciones alérgicas mediadas por IgE mediante el análisis de la superficie del antígeno CD63 en los basófilos tras su estimulación con alérgenos, utilizando la citometría de flujo.

  • Sin exposición del paciente a ningún alérgeno

  • Determinación más específica de los basófilos que otros ensayos.

  • Ensayo sencillo y rápido de llevar a cabo: contiene controles positivos y negativos en tubos liofilizados, para facilitar su manipulación.

  • Ofrecemos 3 kits diferentes en función de las necesidades clínicas.

Kit de detección de activación de basófilos

Kit de diagnóstico para la determinación cuantitativa de la degranulación de los granulocitos basófilos en sangre.

Utilizando alérgenos definidos, esta prueba proporciona información relativa a los trastornos alérgicos mediados por IgE a través del antígeno CD63 como marcador de la activación de los basófilos.

En las personas susceptibles, las células B producen IgE en respuesta a antígenos específicos como alimentos, pólenes, látex y fármacos. Esta IgE específica para el antígeno (o alérgeno específico) circula en el suero y se une a los receptores de IgE de alta afinidad en las células efectoras inmunitarias, como los mastocitos, ubicados en todo el cuerpo.

Tras una posterior exposición al mismo alérgeno, los receptores de IgE se entrecruzan e inician eventos de señalización descendentes que desencadenan la degranulación de los mastocitos y una respuesta alérgica inmediata, de ahí el término hipersensibilidad inmediata.

¿Por qué analizar la superficie del antígeno CD63 en los basófilos?

El kit se basa en el método descrito por Sainte-Laudy et al. 1994, en el que la activación de los basófilos por los alérgenos se detecta mediante citometría de flujo medida por el aumento de CD63 (gp53) en la superficie celular. De esta forma, Basostep permite la determinación cuantitativa de la degranulación de los basófilos humanos.

Se sabe que los basófilos son una fuente temprana y abundante de citoquinas Th2 y otros mediadores de la inflamación Th2.

Debido a la sensibilización de los basófilos con la IgE específica del alérgeno, representan una población efectora importante en la patogénesis alérgica.

También se reconoce cada vez más la capacidad de los basófilos para modular la inmunidad adaptativa.

Se selecciona la población de R2, que contiene la población de basófilos.

Utilizando la intensidad de fluorescencia de CD63 se analizan los resultados.

El histograma es una representación de una muestra de sangre total normal lisada con CD123+/CD203c+/HLA-DR-. El control negativo está representado por el histograma morado y el control positivo por el histograma azul.

  • Se selecciona la población de R2, que contiene la población de basófilos.

  • Utilizando la intensidad de fluorescencia de CD63 se analizan los resultados.

  • El histograma es una representación de una muestra de sangre total normal lisada con CD123+/CD203c+/HLA-DR-. El control negativo está representado por el histograma morado y el control positivo por el histograma azul.

Determinación más específica de los basófilos que otros ensayos

El ensayo incluye el péptido quimiotáctico N-formil-Met-Leu-Phe (fMLP) como control positivo y un cóctel de anticuerpos para la detección y determinación de la activación de los basófilos degranulados.

Por lo tanto, el ensayo BASOSTEP se basa en la estimulación in vitro de los basófilos utilizando fMLP como control positivo y el posterior análisis por citometría de flujo de la expresión de la membrana de CD63 en los basófilos después de la degranulación.

Rendimiento del kit BasoStep:

Utilizando alérgenos definidos, esta prueba es capaz de proporcionar información altamente fiable sobre la capacidad de liberación de los basófilos portadores de IgE.

Cuando los receptores de IgE de los basófilos son reticulados por un alérgeno, las células sufren una degranulación a través de gránulos citoplasmáticos que contienen la proteína transmembrana CD63 que se fusionan con la membrana plasmática y liberan mediadores inflamatorios. Por lo tanto, el antígeno CD63 se expone como un marcador de la activación de los basófilos.

El siguiente histograma corresponde al análisis de una muestra de sangre de un individuo sano utilizando el Basostep. Utilizando la intensidad de fluorescencia de CD63 analice los resultados.

Referencias de Producto
BSTP-100T

Staining reagent: CD63 FITC, CD203c PE, HLA-DR PERCP, CD123 APC. Positive Control. Estimulation Buffer| Download (TDS)

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BSTP2-100T

Staining reagent: CD63 FITC, CD123 PE, HLA-DR PERCP. Positive Control. Estimulation Buffer| Download (TDS)

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BST3-100T

Staining reagent: CD63 FITC, CD123 PE, HLA-DR APC. Positive Control. Estimulation Buffer| Download (TDS)

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