¿Por qué analizar la superficie del antígeno CD63 en los basófilos?
El kit se basa en el método descrito por Sainte-Laudy et al. 1994, en el que la activación de los basófilos por los alérgenos se detecta mediante citometría de flujo medida por el aumento de CD63 (gp53) en la superficie celular. De esta forma, Basostep permite la determinación cuantitativa de la degranulación de los basófilos humanos.
Se selecciona la población de R2, que contiene la población de basófilos.
Utilizando la intensidad de fluorescencia de CD63 se analizan los resultados.
El histograma es una representación de una muestra de sangre total normal lisada con CD123+/CD203c+/HLA-DR-. El control negativo está representado por el histograma morado y el control positivo por el histograma azul.
Determinación más específica de los basófilos que otros ensayos
El ensayo incluye el péptido quimiotáctico N-formil-Met-Leu-Phe (fMLP) como control positivo y un cóctel de anticuerpos para la detección y determinación de la activación de los basófilos degranulados.
Por lo tanto, el ensayo BASOSTEP se basa en la estimulación in vitro de los basófilos utilizando fMLP como control positivo y el posterior análisis por citometría de flujo de la expresión de la membrana de CD63 en los basófilos después de la degranulación.
Rendimiento del kit BasoStep:
Utilizando alérgenos definidos, esta prueba es capaz de proporcionar información altamente fiable sobre la capacidad de liberación de los basófilos portadores de IgE.
Cuando los receptores de IgE de los basófilos son reticulados por un alérgeno, las células sufren una degranulación a través de gránulos citoplasmáticos que contienen la proteína transmembrana CD63 que se fusionan con la membrana plasmática y liberan mediadores inflamatorios. Por lo tanto, el antígeno CD63 se expone como un marcador de la activación de los basófilos.
El siguiente histograma corresponde al análisis de una muestra de sangre de un individuo sano utilizando el Basostep. Utilizando la intensidad de fluorescencia de CD63 analice los resultados.
